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實驗8-抗腫瘤-
2023-04-10
甘草多糖免疫學(xué)實驗研究解讀（八）
甘草多糖抗腫瘤實驗
于長水
在甘草多糖提純后，成為非特異免疫原性新物質(zhì)。在研發(fā)過程中，在投入市場應(yīng)用前，在動物中實驗觀察了甘草多糖抗腫瘤（癌）的作用，包括甘草多糖抑瘤作用、甘草多糖對荷瘤生存時間的影響。
甘草多糖抑瘤作用實驗
實驗由天津腫瘤醫(yī)院研究所流行病室進(jìn)行。
實驗材料與方法：
實驗選用昆明種純系小鼠，隨機(jī)分為四個組，每組十只。實驗組三個組，分別為按50毫克、100毫克、200毫克不同劑量甘草多糖組，設(shè)一對照組。
腫瘤細(xì)胞取自已經(jīng)生長腹水瘤的小鼠，取腹水在顯微鏡下計瘤細(xì)胞數(shù)，各組按瘤細(xì)胞0.1毫升注射在小鼠腹股溝皮下。在注射瘤細(xì)胞24小時后，開始按不同劑量注射甘草多糖液于腹腔，對照組注射腹腔同容量生理鹽水。
連續(xù)注射7天，最末一次后繼續(xù)飼養(yǎng)1周。然后解剖小鼠，取腫瘤組織稱重，并測量體積，還做病理檢查。
實驗研究結(jié)果與解讀：
一、腫瘤組織重量
對照組腫瘤重量平均為1.40克。
甘草多糖50毫克組腫瘤重量平均為0.66克。
甘草多糖100毫克組腫瘤重量平均為0.43克。
甘草多糖200毫克組腫瘤重量平均為0.61克。
從腫瘤平均重量看，甘草多糖各組平均為0.43克~0.66克，顯著低于對照組腫瘤平均重量的1.40克，比對照組重量減輕了約40%~60%。顯示了甘草多糖抑制腫瘤生長的作用。
二、腫瘤體積測量
對照組中腫瘤體積最大的為1.8×2×2（cm3）
甘草多糖50毫克組中腫瘤體積組大的為1.3×0.6×0.5（cm3）
甘草多糖100毫克組中腫瘤體積組大的為1.4×0.8×0.3（cm3）
甘草多糖200毫克組中腫瘤體積組大的為1.3×0.7×0.5（cm3）
從各組腫瘤中體積最大的看，甘草多糖各組腫瘤中體積最大的為0.34~0.46 cm3，顯著比對照組7.2 cm3體積縮小了90%以上。打個比方說，對照組中腫瘤體積最大的像個栗子，而甘草多糖各組中腫瘤體積最大的只有一個花生仁大小。顯示了甘草多糖抑制腫瘤生長的作用。
三、腫瘤病理檢查
對照組與甘草多糖各組小鼠淋巴結(jié)均未見轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞。
如此設(shè)想，上述抑瘤實驗研究，是在給小鼠注射腫瘤細(xì)胞后24小時才給予甘草多糖的實驗結(jié)果；如果，先給予了甘草多糖后再注射腫瘤細(xì)胞，可能發(fā)揮更為顯著的抑瘤作用。
甘草多糖對荷瘤小鼠生存時間的影響
實驗由天津市腫瘤研究所流行病室進(jìn)行。
實驗材料與方法：
實驗取小鼠50只，隨機(jī)分成5個組，同樣飼養(yǎng)。選用處于對數(shù)生長期的艾氏腹水瘤，計數(shù)制成注射液，每只小鼠腹腔注射0.1毫升。
甘草多糖分兩種給藥方法：
1~3組為后給藥組，在小鼠后腿腹股溝皮下注射、腹腔接種艾氏腹水瘤4小時后，1、2組開始每日分2~3個點皮下注射甘草多糖液1周，3組為對照組，注射等量生理鹽水。
4、5組為先給藥組，與后給藥組方法相同，4組為實驗組給甘草多糖液1周，再腹腔接種艾氏腹水瘤液。5組為對照組注射生理鹽水1周，再腹腔接種艾氏腹水瘤液。
荷瘤（即帶瘤）小鼠生命延長時間，實驗組從停止給藥后、對照組從停止給水第一天起計算。
結(jié)果與解讀：
一、
1~3組后給藥組四周內(nèi)小鼠存活天數(shù)
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組別 小鼠只數(shù) 平均存活天數(shù) 生命延長率% |
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對照組（3組） 10 12.8 ——
1組實驗組
2組實驗組 |
4、5組先給藥組四周內(nèi)小鼠存活天數(shù)
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組別 小鼠只數(shù) 平均存活天數(shù) 生命延長率% |
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對照組（5組） 10 17.8 ——
4組實驗組 |
二、在實驗中觀察到，后給藥的對照組（生理鹽水組）小鼠在停止給藥的第7天開始出現(xiàn)死亡，半數(shù)以上在第10天前死亡，第16天時已有80%死亡，第27天時全部死亡。
后給藥的實驗組小鼠在停藥后第12天開始出現(xiàn)死亡，至第20天約半數(shù)死亡，至第8周時甘草多糖高劑量組仍有半數(shù)小鼠存活，低劑量組也有40%存活。
先給藥的荷瘤小鼠存活時間，從接種艾氏腹水瘤后的第1天開始計算。對照組從接種瘤后第12天開始出現(xiàn)小鼠死亡，半數(shù)以上在3周內(nèi)死亡，24天時小鼠已全部死亡。
實驗組小鼠從第14天開始出現(xiàn)死亡，第4周時有半數(shù)以上小鼠死亡，觀察至第8周時仍有20%存活。
三、甘草多糖抗腫瘤實驗研究，展現(xiàn)諸多啟示：
1、甘草多糖具有抑制小鼠腫瘤重量與體積的顯著作用，證明抑制了腫瘤細(xì)胞的異常增殖；
2、甘草多糖對于荷瘤小鼠具有延長存活天數(shù)與生命延長率提高的作用，證明可使小鼠荷瘤生命延長率達(dá)64.8%~73.4%。
3、甘草多糖作為一種高效免疫調(diào)節(jié)劑，將有效聯(lián)合用于腫瘤防治。
4、先給藥組的小鼠實驗結(jié)果，含有提早防治腫瘤的意義。
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